【乳品小课堂】β-内酰胺酶篇：与君常相悉

 β-内酰胺酶的常规检测方法有杯蝶法和胶体金快速试纸条法，而胶体金快速试纸条法因方便快捷，经济高效，被广泛使用。因此，有效掌握β-内酰胺酶快速检测试纸条的使用尤为重要。

 

今天的小课堂，咱们就主要来看看β-内酰胺酶快速检测试纸条在使用过程中的常见问题排查。

 

为什么样品中不含β-内酰胺酶，而检测结果为阳性，造成检测结果假阳性的因素有哪些？

 

假阳性原因可能为：

 

1. 检测过程中移液器枪头，手套或者加热器污染β-内酰胺酶，并带入到待测样品中，导致检测结果偏高。

 

2. 由于保存条件或其他环境因素的影响，使得白色微孔内抗生素有一定程度的降解，导致检测结果偏高。

 

3. 在取出白色微孔，撕开封膜的过程中，用力不当致使白色微孔内容物洒出，抗生素含量减少，从而检测结果假阳性。

 

4. 待测样品在放置过程中有内源性β-内酰胺酶产生并释放，导致出现假阳性结果。

 

5. 检测过程中，不当的操作步骤，比如检测人员吸取奶样超过200微升，白色微孔未溶解均匀，或者延长步9分钟孵育时间，都有可能造成检测结果偏高。

 

为什么样品中含有β-内酰胺酶，而检测结果为阴性，引起检测结果出现假阴性的因素有哪些？

 

原因可能为：

1. 样品储存条件不当，比如高于室温长时间存放，导致β-内酰胺酶降解。建议检测的样品要存放在4℃，且存放时间不超过3天。

 

2. 样品中添加的叠氮化钾和重铬酸钾类的防腐剂，舒巴坦和克拉维酸等酶抑制剂以及酸败或者添加碱类物质都会对检测造成干扰，使得检测结果出现假阴性的可能。

 

3. 检测区内的物品，像加热器，移液器，枪头等污染β-内酰胺类的抗生素，会使酶活性受到抑制，从而检测结果偏低。尤其刚测完β-内酰胺类的抗生素后要完成清场工作。

 

4. 检测人员不正确的操作步骤，比如取样量明显小于200微升，或者步孵育时间不足9分钟，或者加热器温度不到40℃等，都有可能造成检测结果偏低。

 

为什么检测β-内酰胺酶的过程中，检测结果时而阴性，时而阳性，出现阴阳反复的情况？

 

1. 样品中有一定含量的β-内酰胺酶，而且其活性恰好在试纸条检测的临界值，环境条件或者人为操作的波动使得检测结果阴性和阳性反复出现。

 

2. 样本自身理化性质的不稳定，比如脂肪聚集，内部不溶物颗粒等因素使得取样不均匀，检测的样品结果有差异。

 

3. 白色微孔中抗生素受潮或蒸发，抗生素含量的参差不齐也会对结果造成影响。

 

4. 检测过程中取样量的多少，随意缩短和延长孵育时间都会使检测结果发生波动。

 

检测结果和其他厂家产品检测结果不一致怎么办？

 

1. 首先，先确定两种检测方法或者两个检测产品检测限是否一致，产品A检测限是2U/mL，产品B检测限4U/mL，若样品中酶活性3U/mL，产品A检测结果阳性，而产品B检测结果则为阴性。

 

2. 确定检测方法完全按照说明书要求完成，产品A和产品B说明书中取样量，孵育温度和时间等可能不完全一致，一定要按照各自说明书进行操作。

 

3. 检测的样品要一致，储存条件要合适。同样的奶和加工后的奶粉检测结果不一定完全一致。